萱草组织培育及植株再生的研究

萱草组织培育及植株再生的研究
摘要：目的：研究药用植物萱草的组织培育技术。为工厂育苗提供科学依据。方式：以萱草的幼嫩花梗为外植体，采取MS培育基，附加不同的植物激素举行实验。效果：愈伤组织诱导的较佳培育基配方是MS+6-BA1.0mg?L+NAA0.1 mg?L，不定芽诱导的较佳培育基配方是MS+6-BA1.0 mg?L+NAA0.1 mg?L，不定根诱导的较佳培育基配方是1/2MS+IBA0.1 mg?L+NAA0.1 mg?L。结9k：以幼嫩花梗为外植体。通过诱导愈伤组织途径可以到达快速繁殖的目的。 下午词：萱草；组织培育；植株再生 中图分类号：R285.5
文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)12-2552-02
萱草Hemerocallis fulva L.系百合科(Liliaeea)多年生草本植物，以根及根茎入药，为我国传统中药“萱草根(Ra-dix Hemerocallis)”，具有清热凉血、利尿通淋的成果，用于治疗水肿、小便晦气、淋浊、带下、黄痘、便血、崩漏等症。近年来研究注释萱草根中含有多种蒽醌类和二氢呋喃-γ-内酰铵类化合物，这些身分具有抗菌、抗癌、杀虫等生物活性。 萱草不仅具有药用价值，还具有蔬菜食用和花卉观赏价值。其花经过加工后是颇负盛名的“黄花菜”、“金针菜”，营养丰富，且具有保健益寿之功。而其观赏价值体现在萱草花秀美俊俏、雅而不俗、人见人爱，令人欢喜，解忧忘愁，是“中国的母亲花”、“忘忧草”。以往报道的萱草组织培育的文章，是基于观赏花卉品种的快速繁殖技术的实验研究，而在药用和食用方面缺乏思索和实践。因此，作者借鉴这些研究成果，对药用植物萱草开展了组织培育技术方眼前期实验工作，期望为进一步研究其药材质量以及开发中药成果保健类蔬菜奠基基础。
1.质料与方式
1.1质料 供试植物质料采自北方国家级林木种苗树模基地栽植的生长结实、无病虫害的带花萱草植株，经首都医科大学中医药学院中药资本学教研室刘长利博士判断为H.fulva，外植体为萱草的幼嫩花梗。
1.2方式 ①无菌外植体的得到：将外植体先用毛刷蘸洗涤剂洗净，再用流水冲洗清洁。在无菌条件下用75％的酒精消毒30s，再用0.1％的HgCl溶液浸泡5min，较后用无菌水冲洗6～8次，在无菌条件下切成1～1.5cm长的小段举行接种。②培育条件：培育条件为MS培育基，附加0.6％琼脂，pH5.8。培育室温度为(25±2℃，光照12h?d，光照度为20001x。
2.效果与分解
2.1激素对愈伤组织诱导的影响 将萱草幼嫩花梗划分接种于含有不同激素配比的1～6号培育基(蔗糖浓度为3％)中。培育30天后统计各处理愈伤组织诱导情况。效果见表1和图1。

由表1可以看出，植物激素浓度越高越容易诱导出愈伤组织，但当细胞盘据素与生长素浓度到达1：0.05时，愈伤组织色浅不易分化芽，而且玻璃化严重；当细胞盘据素与生长素比例小时，愈伤组织分化率也降低，试验效果注释诱导愈伤组织的较佳培育基配方是MS+6-BA1.0 mg?L+NAA0.1mg?L，所诱导出的愈伤组织黄绿色，且外面有突起的芽点。
2.2激素对不定芽分化与继代增殖的影响 将诱导出的愈伤组织转接到含有不同激素配比的4～7号培育基(蔗糖浓度为3％)中，培育1个周期后观测其生长情况，效果见表2和图2。

由表2可见，细胞盘据素6～BA浓度在0～1.0mg?L之间均能诱导出不定芽(图2所示)，随着其浓度的增高，诱导出的芽数增添，苗子相应变细弱。研究效果注释：随着继代次数的增添，较高浓度的细胞盘据素6-BA，容易引起玻璃化，苗子不结实。在生产历程中随着继代次数的增添应逐步降低细胞盘据素的浓度，直至为零。
2.3激素对不定根诱导培育的影响 经过一段时间的继代培育后，将丛生芽切分成带小量愈伤的单株转到含有不同激素配比的8～10号培育基(蔗糖浓度为2％)中。半月后观测其生根情况，效果见表3和图3。

由表3可见，萱草组培苗生根较容易。实验效果注释：诱导不定根培育的较佳培育基配方是1/2MS+NAA0.1mg?L+IBA1.0mg?L。经过8～10天后开始长出乳白色星状根(如图3所示)，至15天时，生根率较高可达99.5％。
2.4组培苗的移栽 当组培苗根长至1cm时，将培育瓶放在自然光照下炼苗3～5天后，打开瓶盖再炼苗3～5天，轻轻取出组培苗，洗净培育基后，移栽到经0.1％KMnO溶液消毒过的基质中，保持一定的温度和湿度，驯化成活率可达95％以上，2周后待长出新叶即可移栽到苗圃，移栽成活率可达100％。
3.讨论
萱草一般采取分蘖方式举行增殖，1株萱草每年仅可繁殖4～5株，难以适应市场商品化生产的要求。本文通过对萱草的组织培育和植株再生的实验研究，成立了以萱草幼嫩花梗为外植体、诱导愈伤组织、不定芽分化、生根培育及炼苗移栽的技术系统，该技术取材容易，消毒简捷，移栽成活率高，是加速繁殖速度的有用途径，为工厂化育苗提供了科学的实验依据，为进一步研究其药用身分含量、开发中药成果保健类蔬菜奠基了基础。