垂吊矮牵牛组织培育技术研究

杨永花

(兰州市园林科学研究所730070)

垂吊矮牵牛(Petunia?Spreding)为茄科矮牵牛属的多年生蔓生植物，是近年来较为时尚的垂吊型花卉装饰植物。现在该品系重要依赖从外洋引进F1代种子举行播种繁殖，但种子价格昂贵(单价2.5元/粒)，细小，播种难度大，种子繁殖又易发生变异，出现杂色，而扦插繁殖苗分枝力弱，株型单薄，严重影响其观赏价值。播种、扦插都难以在短时间内生产出批量的优质种苗。因此，采取组织培育技术举行快速繁殖，可解决繁殖系数低、种子价格昂贵等问题，从而满足市场的大量要求。

一、材料与方式

1?取材与消毒
在日光温室中选择生长结实、无病虫害植株的幼嫩叶片，作为外植体材料，用自来水冲洗清洁，再用蒸馏水冲洗2～3次，置于超净工作台上，先用70%的酒精浸泡10秒钟，无菌水冲洗一次，再用1‰的升汞消毒5～6分钟，无菌水冲洗4～5次，待接种。
2?培育基及培育条件(培育基单位mg/L)
试验所选用的培育基为(1)MS+6BA1+NAA0.1；(2)MS+6BA2+NAA0.2；(3)MS+6BA0.5+NAA0.1；(4)MS+KT0.5+NAA0.1；(5)1/2MS；(6)1/2MS+IBA0.1；(7)1/2MS+IBA0.2；(8)1/2MS+NAA0.03。以上培育基中均加入琼脂3.3g/L，MS中加入白糖30g/L，1/2MS中加入白糖20g/L，pH值均为5.8，培育温度(25±2)℃，光照强度1500LX～2000LX，光照时间10～12h/d。
3?实验方式
将叶片剪成1cm2大小的方块，接种在培育基(1)和(2)中，诱导愈伤组织及不定芽的形成。每处理10块叶片，待外植体萌发发生麋集的不定芽丛后，支解成1cm2大小的方块，继代培育在(3)和(4)中，每处理接20块不定芽丛。培育10天后统计高于2cm的结实幼苗，并将高于2cm的结实幼苗剪切下来转接到(5)～(8)中举行生根，每处理接40棵幼苗，培育一周后统计幼苗生根情形。当生根试苗根系生长至1cm以上，苗高4～5cm时举行移栽。

二、试验效果

1?芽诱导分化
接种到培育基(2)中的叶片，培育1周后，叶片边缘开始出现淡绿色愈伤组织，叶片渐变厚并弯曲成拱形状，2周后愈伤组织上出现绿色突起(即芽点)，3周开始分化，发生麋集的丛生芽，诱导率达100%。接种到培育基(1)中的叶片培育10天后，叶片边缘开始出现浅绿色愈伤组织，叶片加厚，并膨大凸起。3周后愈伤组织上出现希罕的绿色芽点，1个月后开始分化发生丛生芽，诱导率达90%。叶片在培育基(2)中比(1)中分化所需时间短，分化率高，且发生麋集的丛生芽。因此，MS+6BA2+NAA0.2更适宜叶片诱导培育。
2?芽的增殖继代
继代于(3)中的叶片不定芽丛培育10天后，每块不定芽可增殖15～20个高于2cm的幼苗，但幼苗茎杆细弱，需经过壮苗培育才能转接到生根培育基中举行生根。继代于(4)中的不定芽丛培育10天后，每块不定芽均可增殖30～40个高于2cm的幼苗，且幼苗茎杆粗壮，叶片浓绿，生长势强，可直接转接到生根培育基中举行生根。因此，MS+KT0.5+NAA0.1是丛生芽增殖的较佳继代培育基。
3?生根培育
结实幼苗在生根培育基(5)和(6)中，培育5天后开始生根，培育10天后，(5)中幼苗根细弱，每株均匀有12条根，部门幼苗叶尖变白，(6)中幼苗根粗壮，均匀有20条根，幼苗生长兴旺，(7)中幼苗7天开始生根，根粗短，均匀只有9条根，(8)中幼苗8天开始生根，根粗短，均匀有16条根，幼苗生长结实。因此，从开始生根天数、均匀根数及幼苗生长势看，1/2MS+IBA0.1为幼苗较佳生根培育基，根多而粗壮。

三、炼苗与移栽
生根苗根系长至1cm以上，株高4～5cm时即可举行炼苗移栽。移栽前先在自然条件下打开瓶口炼苗2～3天，轻取试管苗，用温水洗清洁根部粘附的培育基，移栽到新的蛭石基质中，用1‰的多菌灵溶液浇湿基质，用75%的遮荫网遮荫保湿，1周后逐渐透风透光，生长适温控制在22℃左右。

四、小结与讨论
1?通过组织培育技术可快速生产出垂吊矮牵牛幼苗，解决了其种子依赖入口等问题，降低了生产成本，为大规模商业化生产种苗提供了一条捷径。生产的植株分植习性好，叶片浓绿，花色鲜艳，花期长。
2?在实验范围内，垂吊矮牵牛叶片诱导愈伤组织形成丛生芽的较佳培育基为MS+6BA2+NAA0.2，较佳增殖继代培育基为MS+KT0.5+NAA0.1，较佳生根培育基为1/2MS+IBA0.1。
3?生根试管苗根系长至1cm以上，株高4～5cm时即可炼苗移植，移栽成活率达95%以上。